*** Angel changes topic to "Curso "Principios biológicos de la Inflamación" Burgos, 1-18 Febrero, 1999 (http://bio.hgy.es/inflamac)" [18:13] El título, programa e imágenes de este curso están en: [18:13] http://bio.hgy.es/inflamac [18:13] Para esta segunda parte, pueden verse las diapositivas en : [18:13] http://bio.hgy.es/inflamac/Infla2/index.htm [18:13] 2. INFILTRACIÓN CELULAR . [18:13] Tiene por objetivo aportar las células del torrente circulatorio al tejido inflamado para la realización entre otras funciones, la fagocitosis. [18:13] La extravasación de las células se realiza de forma continua según un programa definido en la reacción bioquímica que se produce desde el inicio de la reacción, iniciándose en la fase de congestión pasiva o de estasis de la microcirculación, en donde junto a la hemoconcentración vascular, los hematies se disponen en el centro y los leucocitos se sitúan en las proximidades de la pared endotelial del capilar. [18:14] Las células sanguineas: [18:14] Los leucocitos estan representados por los Granulocitos (células que presentan gránulos en su citoplasma) y las células Monucleares (células que presentan una núcleo oval único y no lobulado como en caso de los granulocitos. A estas células también se les denomina células redondas frente a las anteriores que son polinucleares). El termino de Fagocito se refiere a los neutrofilos y a los macrofágos derivados de los monocitos, por su función de fagocitosis. [18:14] CARACTERISTICAS MÁS IMPORTANTES DE LOS NEUTROFILOS. [18:14] * Producidos a partir de la maduración de células precursoras en la médula osea. [18:14] * Son los mas numerosos de la sangre y su numero aumenta con la inflamación aguda - leucocitosis. [18:14] * Tienen una vida corta una vez activados en los tejidos - entre 6 y 9 horas. [18:14] * Son móviles (ameboides), capaces de pasar desde la luza vascular a los tejidos. Sus movimientos son dirigidos y atraídos por quimiotaxis. [18:14] * Fagocitan de forma activa. [18:14] * Contienen gránulos ricos en diversas proteasas. [18:15] * Generan radicales libres para destruir las bacterias fagocitadas. [18:15] * Son una fuente de ácido araquidónico para facilitar la producción de prostaglandinas. [18:15] * La producción de neutrófilos en la médula ósea es estimulada por citoquinas generadas en la respuesta inflamatoria. [18:15] Los neutrófilos son las principales células efectoras en la inflamación aguda. [18:15] Sucesos celulares en los leucocitos. Exudación. [18:15] En la corriente sanguinea normal los leucocitos se disponen en el centro del vaso arrastrados por la corriente y separados de la pared del vaso por el plasma. El enlentecimiento circulatorio en las fases de hiperemia, congestión, estasis circulatoria, los leucocitos se aproximan a la pared del vaso iniciándose los mecanismos que van a permitir su salida del vaso [18:15] 1. Marginación celular. Las células se disponen en los bordes de la pared capilar. [18:15] 2. Rodamiento y adhesión celular . Las células se " pegan " al endotelio. [18:16] 3. Emigración celular . Las células atraviesan la pared capilar entre las " brechas " intercelulares, atravesando la membrana basal. [18:16] 4. Quimiotaxis . Emigración celular dirigida por mensajeros químicos hacia el foco inflamatorio. [18:16] 5. Opsonización: Señalización activa de los agentes a destruir por las células. [18:16] 6. Fagocitosis: Mecanismo activo de destrucción de los agentes, las células lesionadas. [18:16] 1.Marginación celular: [18:16] La estasis en la microcirculación condiciona un cambio en la disposición de las células en le vaso. Los hematies se disponen en el centro - aglutinan - y los leucocitos se aproximan al endotelio se marginan. Se realiza fundamentalmente a nivel de las venulas. [18:16] 2. Rodamiento y adhesión celular: [18:16] Es un proceso muy complejo y esencial en la salida de las células de los vasos. [18:16] Los leucocitos marginados ruedan sobre la superficie endotelial, fijándose de manera transitoria sobre la pared del vaso . Este rodamiento es mediado por la unión de moléculas adhesivas complementarias sobre los leucocitos y las superficies endoteliales, análogos al ajuste entre una llave y la cerradura. [18:16] La activación del endotelio es un proceso básico en la inflamación aguda. [18:16] La identificación y caracterización tanto funcional como inmunológica, de las moléculas de adhesión celular se ha realizado en estos últimos 10 años y se ha demostrado que juegan un papel esencial en la regulación del flujo de las células entre el medio vascular y el territorio inflamado y su conocimiento nos permite abordar de una nueva manera las disfunciones y disregulaciones que se observan en la clínica. [18:17] Las moléculas de adhesión celular que controlan las relaciones leucocito - endotelio pertenecen a tres grandes grupos: [18:17] 1. integrinas. [18:17] 2. inmunoglobulinas. [18:17] 3. selectinas. [18:17] 1.Integrinas: Son una familia extensa de glucoproteínas transmembranas que se "expresan " o manifiestan funcionalmente en la superficie y en los gránulos citoplasmáticos de muchas células. Funcionan también como receptores celulares para la matriz extracelular e intervienen en un gran cantidad de procesos tras su interacción con diferentes contra-receptores o ligandos. [18:17] Las integrinas se expresan constitutivamente en los leucocitos en reposo pero no se adhieren a sus ligandos apropiados en tanto los leucocitos no sean activados por agentes quimiotácticos u otros estímulos (células endoteliales, células lesionadas en el sitio de la lesión) Solo entonces las integrinas sufren el cambio conformacional necesario para conferirles elevada afinidad de uníon con las moléculas de adhesión endoteliales. [18:17] Integrinas: LFA-1 (CD1 a/CD18) [18:17] MAC1 (CR3, CD 11b, CD18) [18:17] pl50,95 (CD11c/ CD18). [18:17] 2. Inmunoglobulinas: [18:18] A este grupo pertenecen la mayoria de las móleculas de superficie celular y en concreto, el 50 % de las glucoproteínas de ls superficie leucocitaria. Entre las funciones que realizan en el membrana celular son: receptores para factores de crecimiento, receptores para la región Fc de las Ig y, moléculas de adhesión. [18:18] Inmunoglobulinas: [18:18] ICAM- 1, ICAM - 2, ICAM - 3 (moléculas de adhesión intercelular) [18:18] VCAM-1, (molécula de adhesión de las células vasculares) [18:18] Ambas incrementan su expresión de superficie luego de la estimulación den endotelio por diferentes citocinas. [18:19] CD31 [18:19] MadCAM -1. [18:19] 3. Selectinas: [18:19] Glucoproteínas transmembrana estructuralmente relacionadas y que reconocen carbohidratos . [18:19] Selectinas [18:19] L - selectina LECAM-1 dispersa sobre la superficie de casi todos los leucocitos. [18:19] P - selectina GMP- 140 presente sobre el endotelio y las plaquetas [18:19] E - selectina ELAM-1 confinada al endotelio [18:19] Las selectinas endoteliales se encuentran en concentraciones bajas o no se encuentran condiciones normales. Con los estímulos se regulan por mediadores específicos . esto permite un grado de especifidad de unión restringida a sitios en donde esta ocurriendo la lesión . [18:19] La selectina P se encuentra en los corpúsculos intracelulares de Weibel-Palade de las células endoteliales, despues de unos minutos de exposición a la histamina, trombina o factor activador de plaquetas PAF, la selectina P se distribuye en la superficie celular, facilitando la unión de los leucocitos. [18:19] La selectina E, ausente en las células endoteliales normales, por la estimulación de mediadores como la IL-1 y el factor de necrosis tumoral se expresa en la superficie de las células. [18:20] Los leucocitos se adhieren de forma firme a la superficie endotelial - adhesión - antes de deslizarse entre las células y atravesar la membrana basal hacia el espacio extravascular - diapedesis. [18:20] MECANISMOS: [18:20] 1. Redistribución de las moléculas de ahhesión hacia la superficie celular: [18:20] Las P- selectina existen en la membrana de los gránulos intracitoplasmáticos endoteliales específicos - Weibel-Palade . Al ser estimulada por los mediadores como la histamina, trombina, factor activador de las plaquetas (FAP), la p-selectina se redistribuye hacia la superficie celular, fijando los leucocitos. Esta fase es inicial y probablemente es importante en la fase de rodamiento leucocitario sobre el endotelio. [18:20] 2. Inducción de la síntesis de moléculas de adhesión sobre el endotelio. [18:20] Algunos mediadores de la inflamación, especialmente las citocinas (IL-1 FNT) inducen la síntesis y expresión en superficie de las moléculas de adhesión en las células endoteliales. [18:20] 3. Aumento de la intensidad de fijación . (caida) [18:31] La activación de las células, neutrofilos, monocitos, linfocitos, por factores quimiotácticos u otros estímulos, las integrinas pasan de un estado de baja actividad a un estado de alta afinidad de fijación con las células endoteliales. Este fijación es intensa y necesaria también para la transmigración a través del endotelio. [18:32] Fases: [18:32] 1. adhesión inicial y rápida relativamente laxa que se corresponde con el rodamiento. Implicadas las selectinas -P y L en las células y las selectinas - E, inducidas por las citocinas. [18:32] 2. los leucocitos activados para incrementar la fijación entre ellos y el endotelio. [18:32] 3. los leucocitos se fijan de forma estable al endotelio con la expresión de integrinas- ICAM-1, iniciándose la transmigración. [18:32] 3. Emigración celular: (diapédesis) (pseudopodos) [18:39] Las células abandonan el vaso a través de las "brechas" intercelulares, preferentemente por las vénulas. Atravesar la membrana basal continua es una las dificultades con que se encuentran las células y aunque no es bien conocido probablemente la secreción de colagenasas por las células inflamatorias permitan desintegrar la membrana basal. [18:39] El tipo de leucocito que abandona el vaso depende de la fase en el que se encuentre la inflamación y del tipo de agente que provoca la reacción. [18:39] Los neutrófilos predominan en el infiltrado inflamatorio de las 6 a las 24 horas y posteriormente son sustituidos por los monocitos a las 24 - 48 horas. [18:39] Esta secuencia se explica por la expresión diferente de las moléculas de adhesión celular, de los factores quimiotácticos y la vida de las células - los neutrófilos tienen una vida muy corta desaparecen a las 24 a 48 horas por apoptosis y los monocitos sobreviven más tiempo y pueden persistir por periodos prolongados como macrófagos en los tejidos. [18:39] Patrones en la inflamación aguda según el agente (factor quimiotáctico) y tiempo. [18:40] 1.Presencia de neutrófilos durante las 24 - 48 horas. [18:40] 2.Presencia de monocitos y macrófagos posteriormente. [18:40] * Como excepciones a este patrón [18:40] * Las infecciones por Pseudomonas - los neutrófilos predominan durante el proceso de 2 a 4 días. [18:40] * Las infecciones virales - los linfocitos son las células que se identifican en el proceso inflamatorio agudo. [18:40] * Los procesos de hipersensibilidad - los eosinófilos son las células más importantes. [18:40] * Los procesos por parásitos - los eosinófilos son las células más importantes. [18:40] 1. Quimiotaxis: [18:41] Es la locomoción orientada de las células inflamatorias según un gradiente químico. Las células responden a los estímulos de diferente manera: [18:41] los neutrófilos +++ [18:41] linfocitos + [18:41] Las caracteristicas de los factores quimiotacticos son: [18:41] 1. estimulan la dirección de la migración celular. [18:41] 2. interaccionan con los receptores de los leucocitos [18:41] 3. son solubles en agua y difusibles [18:42] 4. son generalmente peptidos. [18:42] 5. su origen puede ser: [18:42] 6. Exógenos: productos bacterianos [18:42] 7. Endógenos: productos del complemento C3a, C4a, C5a. [18:42] productos de la vía lipoxigenasa, leucotrienios. [18:42] Citokinas (IL - 8) [18:42] Los factores quimiotácticos se unen a receptores específicos sobre la superficie del leucocito e inducen una cascada intracelular de metabolitos fosfolípidos, que con el tiempo producen un aumento del Ca+ intracelular (tanto de origen extracelular como de los almacenes de la propia célula) El aumento del calcio intracelular desencadena el ensamblado de los elementos contráctiles del citoesqueleto de las células para originar el movimiento. Los leucocitos em [18:42] Además de estimular la locomoción, los factores quimiotácticos inducen otras respuestas leucocitarias conocidas genéricamente como Activación de los leucocitos [18:42] * Producción de metabolitos del Ácido Araquidonico a partir de los fosfolípidos. [18:42] * Desgranulación y secreción de enzimas lisosómicas, y generación de la combustión oxidativa. [18:43] * Modulación de las moléculas de adhesión a leucocitos (aumentando o disminuyendo numero o afinidad) [18:43] 8. Opsonización . [18:43] Algunos agentes- bacterias- para ser reconocidas por los neutrofilos y ser fagocitadas necesitan ser señaladas - opsoninas que se unen a los receptores específicos situados en los leucocitos. Los opsoninas más importantes son el fragmento Fc de la Inmunoglobulina G (IgG) y el C3b- también denominado fragmento opsónico de C3. [18:43] 9. Fagocitosis. [18:43] Ingestión y degradación de los microorganismos, materiales extraños, células muertas y sus productos. Se realiza: [18:43] * Englobamiento y formación de vacuolas. [18:43] * Destrucción del material fagocitado por: [18:43] * acción enzimática lisosomica [18:44] * radicales libres. [18:44] * productos del metabolismo del ácido araquidonico. [18:44] * [18:44] Lesiones Tisulares inducidas por los leucocitos: [18:44] La fagocitosis se realiza por el vertido de enzimas lisosomicos en los fagolisosomas, y en ocasiones se escapan hacia el espacio extracelular donde pueden producir lesión y descomposición de la matriz intercelular. Esto puede ocurrir por desgranulación prematura antes del cierre del fagosoma, por un intento de fagocitar el material extracelular o por la presencia de cristales o otras sustancias membranoliticas potentes (cristales de urato en la gota). [18:44] Ademas se producen otros productos que pueden lesionar el tejido en donde se produce la reacción: [18:44] * metabolitos activos del oxigeno [18:44] * productos del metabolismo del A. Araquidonico . [18:45] En realidad, la lesión tisular dependiente de los leucocitos por activación persistente o transitoria de estos es un mecanismos subyacente en muchas enfermedades, entre ellas la artritis reumatoide, ciertas neumopatías crónicas. [18:45] DEFECTOS EN LA FUNCIÓN LEUCOCITARIA [18:45] Dado que los leucocitos son células básicas en la reacción inflamatoria, los defectos en su función genéticos o adquiridos, incrementan la vulnerabilidad a las infecciones, con frecuencia, recurrentes y mortales. Aunque raras, su conocimiento en los momentos especiales permite un mayor conocimiento de la respuesta inflamatoria. [18:45] 1. defectos en la adhesión [18:45] * déficit de adhesión leucocitaria 1 . [18:45] * déficit de adhesión leucocitaria 2 [18:45] Se producen como causa genética por defectos en la síntesis de las integrinas leucocitarias con deficientes adherencias de las células al endotelio. [18:45] 2. defectos en la quimiotaxis o en la fagocitosis. [18:46] * Síndrome de Chediak- Higashi. [18:46] Las alteraciones en el ensamblado de los micrótubulos impide la locomoción celular y la degranulación de los lisosomas. [18:46] 2. defectos en la actividad microbicida: [18:46] * Granulomatosis crónica CGD: Déficit de uno de los componentes de la oxidasa NADPH, dificultandose la producción de superóxido, disminuyendose la capacidad bactericida de las células frente a las bacterias [18:46] * Déficit de mieloperoxidasa . [18:46] * [18:46] Algunas enfermedades adquiridas [18:46] la quimiotaxis se encuentra disminuida. [18:47] * Lesión por calor [18:47] * Diabetes [18:47] * Neoplasias [18:47] * Sepsis [18:47] * Inmunodeficiencias [18:47] La adhesión celular se encuentra disminuida. [18:47] * Hemodiálisis [18:47] * Diabetes [18:47] La fagocitosis y la actividad microbicida se encuentran disminuida [18:48] * Leucemia [18:48] * Anemia [18:48] * Sepsis [18:48] * Diabetes [18:48] * Neonatos [18:48] * Malnutrición. [18:50] Muy bien.... muchas gracias! [18:50] En el salón de actos aun no han terminado.. lo harán en breve [18:50] preparen preguntas! [18:52] piden preguntas en la sala [18:54] Alicia, te has enterado de algo?? [18:59] ha terminado ya las dos partes de esta primera clase del curso... mañana mas!! [18:59] teneis preguntas?? [19:00] en la web ya está el primer log y las dos diapositivas [19:01] las diapositivas del curso de hoy son 10 [19:01] si..... en la 2ª parte, si ves la primera... verás otras 22 [19:02] eso será si encuentro la primera parte del curso, no? [19:03] alicia, vete a la web: http://bio.hgy.es/inflamac [19:03] ahi esta todo ya [19:03] solo falta el texto que acabas de ver pasar [19:06] nos despedimos de aqui: ha terminado la 1ª clase!